農藥殘(cán)留的檢測在紫外(wài)可見分光光度計、分光光度計檢測方(fāng)麵,已經取得了很大進步(bù),紫(zǐ)外可見分光光度計靈敏度(dù)的(de)提高,穩(wěn)定性的提高給予農藥殘留的檢測能力(lì)、檢測限、覆蓋範圍等帶來了非常大的提升。(如雙光束(shù)紫外可(kě)見分(fèn)光光度計UV1901PC)具備雙(shuāng)光束光學係統,參比和(hé)樣品可同時放入,提高了分析效率(lǜ)和準確性。有(yǒu)利於加強農藥殘(cán)留監控力度。同時UV1901PC雙光束紫外可見分(fèn)光光度計具備單機掃(sǎo)描(隨開(kāi)機,隨掃描(miáo)),自動繪製標準曲線(一種(zhǒng)殘留(liú)元素(sù),隻需(xū)做(zuò)一(yī)次標準曲線,可儲存於紫外可見(jiàn)分光光度計本機中(zhōng),使用(yòng)時調出。方便實用),單機多波長(一個樣品同時測(cè)出不(bú)同波長的數值。減少實驗時間和操(cāo)作步驟),動(dòng)力(lì)學等(děng)功能(觀察樣品時間上的變化,可長達(dá)10個小時)。
本方法(fǎ)適用於(yú)蔬(shū)菜、水果、相(xiàng)應食物、水及中毒殘(cán)留物中(zhōng)有機類和氨基甲酸酯類農藥殘(cán)留的(de)檢(jiǎn)測。
一定條件中,氨基甲(jiǎ)酸酯類(lèi)農(nóng)藥(yào)、有(yǒu)機磷對(duì)膽堿酯(zhǐ)酶有抑製作用,抑製(zhì)率與農藥的濃度呈正比。用分(fèn)光(guāng)光度計測農殘的方法(fǎ)其實是利用酶(méi)催化乙酰膽堿水(shuǐ)解產物與顯(xiǎn)色劑生成黃色物質,其物質在紫外412nm波長處有吸(xī)收,可以利用紫(zǐ)外可(kě)見分光光度計測定其吸光度隨(suí)時(shí)間的變化(huà)值(使(shǐ)用UV1901PC紫外可見分光光度計動力學(xué)功能(néng)操作簡便)得出蔬(shū)菜中含有(yǒu)機磷或氨(ān)基(jī)甲酸酯類農(nóng)殘留量的(de)情況。
主要儀器:
分光光度計/紫外可(kě)見分(fèn)光(guāng)光度(dù)計,電子天平(píng),移液(yè)槍及配套管嘴,冰箱,超聲波提取儀/萃取儀/處理器(FS-600N)
試劑
PH8.0緩衝溶液(yè) 分別稱(chēng)取11.9g無水磷酸氫二鉀和3.2g磷酸(suān)二(èr)氫(qīng)鉀,溶解於1000ml蒸餾水(shuǐ)中。
顯色(sè)劑 分別稱取160mg5,5-二硫(liú)代2-(硝(xiāo)基苯甲酸)(DTNB)15.6mg碳酸氫鈉,溶(róng)解於20ml緩衝溶液(yè)中,4℃冰箱中保存。
底物 稱取(qǔ)125mg碘化硫代丁(dīng)酰膽堿,溶解於15ml緩衝液中,搖勻後置4℃冰(bīng)箱中保存備用(yòng)。保存期(qī)不超(chāo)過兩周。
丁(dīng)/乙酰膽堿酯酶(méi) 根據酶的活性情況,用(yòng)緩衝液溶(róng)解,3min內(nèi)的吸光度變化控(kòng)製(zhì)在0.4~0.8。搖(yáo)勻後置4℃冰(bīng)箱中保(bǎo)存備(bèi)用(yòng)。
操作(zuò)步驟
樣品(pǐn)處(chù)理 選取有(yǒu)代(dài)表性的蔬菜樣(yàng)品,衝洗掉表明(míng)泥土,剪成(chéng)1cm左右見方碎片(piàn),取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中(zhōng),加入5ml緩衝溶液,手搖振蕩1~2Min,或(huò)超聲波振蕩30s,浸出(chū)提取液,靜(jìng)置(zhì)3~5min,待用。
對照溶液測試(shì) 先(xiān)於試管中加入(rù)50ul酶(méi)液和50ul顯色劑,再加入2.5ml緩衝溶液,搖勻後於37℃放置(zhì)15min,加入50ul底物(wù)搖勻(yún),此時開始反應並(bìng)顯色,要立(lì)即放入分光(guāng)光度計(jì)/紫外(wài)可見分光光(guāng)度(dù)計自動聯樣品池(chí)中,記錄反(fǎn)應3min時(shí)的吸光度。
樣品溶液測(cè)試 先於(yú)試管中(zhōng)加入50ul酶液和50ul顯色劑,再(zài)加入2.5mL樣品提取液,其他操作與(yǔ)對照(zhào)溶液測試相同(tóng),記錄反應3min的吸光度變(biàn)化值(zhí)。
分光光度計法測農藥殘留主要優點:穩定性好,靈敏性(xìng)高。
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